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¿Cuál es la función de la nucleasa?
Enzima que rompe la columna vertebral del ARN o del ADN. La rotura de una hebra genera un corte y la rotura de ambas hebras genera una rotura de doble hebra. Una endonucleasa corta en medio del ARN o ADN, mientras que una exonucleasa corta en el extremo de la hebra.
¿Qué son enzimas de restricción y cómo realizan los cortes?
Las enzimas de restricción son enzimas que cortan ADN. Cada enzima reconoce una o un número pequeño de secuencias blanco y corta el ADN en o cerca de esas secuencias. Muchas enzimas de restricción hacen cortes escalonados que producen extremos sobresalientes de ADN de cadena sencilla.
¿Dónde actúa la ligasa?
La ADN ligasa es una enzima que une ADN. Si dos fragmentos de ADN tienen extremos complementarios, la ligasa puede unirlos para formar una molécula única e intacta de ADN. En la clonación de ADN, se utilizan enzimas de restricción y ADN ligasa para insertar genes y otros fragmentos de ADN en plásmidos.
¿Dónde se encuentra la ligasa?
Uno de los grupos más importantes dentro de la clasificación de las ligasas son la ADN ligasa. La unión de las ADN ligasas está formada por dos cadenas de ADN que se forman usando un diéster fosfórico. Por lo que la ADN ligasas se encuentra dentro de la clasificación EC 6.5.
¿Qué es nucleasa en biologia?
Las nucleasas son enzimas que producen la rotura de los enlaces fosfodiester de la cadena polinucleotídica de los ácidos nucleicos. La vida media para el enlace fosfodiester en el ADN a pH 7 y 24 ˚C se ha estimado en 130.000 años. En las mismas condiciones, la vida media del ARN es de solamente 4 años [1].
¿Qué tipo de enzima es la nucleasa?
Las fosfodiesterasas (PDE) o nucleasas son enzimas hidrolasas (EC 3.1.4) que catalizan la ruptura de los enlaces fosfodiéster, como por ejemplo los que se establecen en los ácidos nucleicos entre la pentosa de un nucleótido y el grupo fosfato de otro.
¿Cuál es la función de las enzimas de restricción?
Las enzimas de restricción cumplen la función opuesta de las polimerasas, ya que estas hidrolizan o rompen el enlace éster dentro del enlace fosfodiéster entre nucleótidos adyacentes en una cadena nucleotídica.
¿Cuáles son los cofactores de las enzimas de restricción?
Estas enzimas requieren dos cofactores para su funcionamiento: el ATP y el magnesio. Las enzimas de restricción de este tipo poseen dos sitios de reconocimiento asimétricos, translocan el ADN de una manera dependiente de ATP y lo cortan entre 20 a 30 pb adyacentes al sitio de reconocimiento.
¿Qué son los fragmentos generados por las enzimas de restricción?
Los fragmentos generados por las enzimas de restricción que han actuado sobre una molécula de ADN particular pueden ser empleados para recrear un “mapa” de la molécula original mediante el empleo de la información sobre los sitios donde la enzima cortó el ADN.
¿Cuáles son las enzimas de restricción del ADN?
El ADN propio no es reconocido por sus enzimas de restricción, puesto que previamente lo ha modificado por metilación a través de la acción de una metiltransferasa, enzima que transfiere grupos metilo desde S-Adenosil-Metionina (SAM) a bases específicas.
